고성능 액체 크로마토그래피를 할 때 주의해야 할 점은 무엇인가요?

이건 너무한데요, 가장 중요한 것은 컬럼을 뒤집지 않는 것입니다. 온도와 유속이 너무 높으면 컬럼이 손상될 수 있습니다. 악기가 손상되지 않는 한 나머지 부분은 다시 수행해야 합니다.

1. 크로마토그래피 컬럼의 이동상이 배수되는지 여부에 대한 질문:

크로마토그래피 분리 실험을 수행하는 많은 사람들이 이러한 상황에 직면했습니다. 실수로 이동상을 보충하지 못했습니다. 시간이 지나면서 펌프가 용매병의 이동상을 빨아들이고 HPLC 시스템이 작동을 멈췄습니다. 이로 인해 컬럼이 손상됩니까? 펌프가 컬럼의 모든 이동상을 배출했습니까? 컬럼을 계속 사용할 수 있나요? 실제로 펌프가 용매병에서 이동상을 배출하더라도 컬럼이 손상되지 않습니다. 펌프에 공기가 채워져 있어도 펌프는 공기를 컬럼으로 배출하지 않습니다. 펌프는 공기가 아닌 액체만 운반할 수 있기 때문입니다.

2. 컬럼이 마르는 문제:

또 다른 가능성이 높은 상황은 크로마토그래피 컬럼 양쪽 끝의 밀봉 캡을 덮는 것을 잊었거나 캡이 너무 헐거운 경우입니다. 기둥이 건조해집니다. 마찬가지로 컬럼 전체가 건조되는 것도 쉽지 않습니다. 대부분의 경우 컬럼 양쪽 끝 부분만 건조되기 때문에 용매가 모두 증발하므로 컬럼이 건조되는 데 오랜 시간이 걸립니다. 기둥이 건조해지더라도 반드시 절망적인 것은 아닙니다. 완전히 탈기된 표면 장력이 낮은 용매(예: 헬륨으로 탈기된 메탄올)로 컬럼을 세척하여 가스를 제거할 수 있습니다. 낮은 표면 장력은 필러 표면을 적시는 데 도움이 되며, 탈기된 용매는 필러에 갇힌 가스를 용해하고 제거할 수 있어야 합니다. 컬럼이 완전히 흡수되어 정상으로 돌아가려면 약 1시간 이상(유속 1mL/분)이 필요합니다.

3. PEEK(폴리에테르에테르케톤) 파이프 및 커넥터를 사용할 때 다음 사항에 주의해야 합니다.

유동 경로를 자주 변경하거나 다른 브랜드로 교체해야 하는 경우 크로마토그래피 컬럼의 경우 PEEK 소재를 사용하면 튜브와 피팅이 유용할 것입니다. PEEK 파이프는 연결하기 쉽습니다. PEEK 커넥터는 도구가 필요하지 않고 손으로 조여 고정할 수 있을 뿐만 아니라 원추형 페럴 외부의 파이프 길이를 쉽게 조정할 수 있어 다양한 브랜드의 크로마토그래피 컬럼에 연결하는 것이 편리합니다. 명세서.

이러한 유형의 재료로 만들어진 파이프라인을 사용할 때 주의할 사항: PEEK는 할로겐화 알칸 및 테트라히드로푸란과 호환되지 않습니다. PEEK 물질을 용해시키는 위의 용매에 대한 뚜렷한 징후는 관찰되지 않았지만, PEEK는 위의 용매를 만날 때 부서지기 쉽습니다. 서양 의학에서 고려하는 또 다른 요소는 압력 한계입니다. 스테인레스 스틸 튜빙은 6,000psi의 압력을 견딜 수 있지만 PEEK 튜빙은 거의 4,000psi만 견딜 수 있습니다(그러나 대부분의 HPLC 응용 시스템은 3,000psi를 초과하지 않습니다).

PEEK 조인트를 사용할 경우 조인트가 용제와 직접적인 접촉이 거의 또는 전혀 없기 때문에 조인트의 내용제성에 대해 걱정할 필요가 없습니다. 그러나 손으로 조이는 PEEK 조인트의 압력 한계는 스테인레스 스틸 파이프의 압력 한계보다 낮습니다. 따라서 압력이 너무 높으면 조인트가 파이프라인에서 미끄러져 데드 볼륨이나 누출이 발생할 수 있습니다.

4. 액상 펌프 고장 방지:

작동 상태가 양호한 펌프는 크로마토그램의 기준선을 안정적으로 만들고 머무름 시간 반복성이 우수해야 합니다. 등용매 용리 중 압력 변동은 2 미만입니다. 구배 용리 중 압력 변화는 느리고 안정적이어야 합니다. 펌프의 우수한 작동 성능을 유지하려면 시스템의 청결도를 유지하고 용매 및 시약의 품질을 보장하며 이동상을 필터링하고 가스를 제거해야 합니다. 펌프 고장을 방지하기 위한 몇 가지 조치는 다음과 같습니다.

1) 고품질 시약과 HPLC 등급 용매를 사용합니다.

2) 이동상과 용매를 필터링합니다.

3) 가스를 제거합니다. 4) 사용 시작 시 매일 환기시키십시오. 작업 후에는 공기를 배출하고 펌프에서 버퍼를 씻어내십시오.

5) 펌프에 물이나 부식성 용매가 남아 있지 않도록 하십시오. 6) 개스킷을 정기적으로 교체하십시오.

7) 필요한 경우 윤활유를 추가하십시오.

8) 다른 권장 사항은 관련 펌프 작동 설명서를 확인하십시오.

9) 결함이 발생한 후 가능한 한 빨리 제거하기 위해 씰, 일방향 밸브(입구 및 출구), 펌프 헤드 장치, 각종 조인트, 퓨즈 및 기타 구성 요소뿐만 아니라 교체 도구는 항상 사용할 수 있어야 합니다.