Pcr 의 원리는 무엇입니까?

PCR 의 원리는 생체 중합 효소 연쇄 반응이다. PCR 기술의 기본 원리는 DNA 의 자연 복제 과정과 유사하며, 그 특이성은 과녁 시퀀스의 양끝과 상호 보완되는 과뉴클레오티드 프라이머에 의존한다. PCR 은 DNA 가 체외 95 C 에서 변성하여 단일 사슬이 되었다는 사실에 기반을 두고 있다. 저온에서 (보통 60 C 안팎) 프라이머와 단일 체인은 염기 상보성 페어링 원리에 따라 결합한 다음 온도를 DNA 중합 효소의 최적 반응 온도 (약 72 C) 로 조절하고 DNA 중합 효소는 인산에서 오당 (5'-3') 방향으로 상보체인을 합성한다.

Pcr 반응의 특징:

1 .. 특이성이 강하다.

프라이머와 템플릿의 결합과 프라이머 체인의 확장은 염기쌍의 원리를 따른다. 중합효소 합성반응의 충실성과 TaqDNA 중합효소의 내고온성으로 인해 반응 중 템플릿과 유인물의 결합 (리 폴딩) 은 고온에서 이뤄질 수 있으며, 결합의 특이성이 크게 높아져 증폭된 목적유전자 조각이 높은 정확도를 유지할 수 있다. 특이성이 높고 보수적인 과녁 유전자 영역을 선택함으로써 그 특이성이 더 높아질 것이다.

2. 고감도.

PCR 생성물의 양은 기하급수적으로 증가하여 테스트될 초기 템플릿을 피크 (pg= 10- 12) 급에서 μg=-6 수준으로 확대할 수 있습니다. 654.38+0 만개의 세포에서 표적 세포를 감지할 수 있습니다. 바이러스 검사에서 PCR 의 감도는 3 RFU (빈 반점 형성 단위) 에 달할 수 있습니다. 세균학에서 최소 검출률은 세균 3 개이다.

3. 간단하고 빠르다.

고온 Taq DNA 중합 효소는 PCR 반응에 사용됩니다. 반응액이 한 번에 첨가된 후 DNA 증액과 수욕솥에서 트랜스젠더-어닐링-확장 반응을 진행하며 증강반응은 보통 2 ~ 4 시간 이내에 완성된다. 증강산물은 일반적으로 전기 영동으로 분석하며 동위원소가 필요하지 않기 때문에 방사성 오염이 없어 널리 보급되기 쉽다.

순도 요구가 낮다.

바이러스나 세균을 분리하고 세포를 배양할 필요 없이 굵은 DNA 와 RNA 를 증폭 템플릿으로 사용할 수 있다. 혈액, 체강액, 양치질액, 머리카락, 세포, 활조직 등 임상 표본의 DNA 증폭과 검사에 직접 사용할 수 있습니다.

바이두 백과-중합 효소 연쇄 반응