선물 PCR

자조법

중합 효소 연쇄 반응 (PCR) 의 조건은 다음과 같습니다.

1 서브사이클 (94 도 5 분)

35 회 주기 (94 도 30 초, 60 도 30 초, 72 도 30 초)

1 서브사이클 (72 도 5 분)

PCR 증강산물을 Pgem-T 전달체 (Promega) 에 복제해 한국면역조절연구센터의 자동DNA 서열분석기 (미국응용생물시스템회사) 로 서열분석을 진행한다. 염료 체인 종료자의 반응 단계와 시퀀스 분석 결과에 따라 역전사 유인물과 겹치는 유인물을 설계한다. 주요 캡시드 단백질 (MCP) 유전자에서 각 핵산의 위치는 각 DNA 체인에서 적어도 두 번 결정됩니다. BLAST 소프트웨어를 사용하여 DNA 및 파생된 아미노산 시퀀스를 GenBank/EMBL 데이터베이스와 비교합니다. "CLUSTAL W" 소프트웨어를 사용하여 서열 분석 [23] 을 한 다음 "Treeview" [20] 소프트웨어를 사용하여 시스템 진화 트리를 구축합니다. 인접법 [22] 을 통해 종간 관계를 결정하고 1000 회' Felsentein' 셀프 서비스법 [6] 을 반복하여' NJ 트리' 의 신뢰성을 도출한다.